Gall halogi diwylliannau celloedd ddod yn broblem fwyaf cyffredin yn hawdd mewn labordai meithrin celloedd, gan achosi canlyniadau difrifol iawn weithiau.Gellir rhannu halogion diwylliant celloedd yn ddau gategori, halogion cemegol fel cyfrwng, serwm a dŵr amhureddau, endotocsinau, plastigyddion a glanedyddion, a halogion biolegol megis bacteria, mowldiau, burumau, firysau, mycoplasmas croes-heintio.Wedi'i halogi gan linellau cell eraill.Er ei bod yn amhosibl dileu halogiad yn llwyr, gellir lleihau ei amlder a'i ddifrifoldeb trwy ddeall ei ffynhonnell yn drylwyr a dilyn technegau aseptig da
1. Mae'r adran hon yn amlinellu'r prif fathau o halogiad biolegol:
Halogiad bacteriol
Yr Wyddgrug a halogiad firws
Halogiad mycoplasma
Halogiad burum
1.1 Halogiad bacteriol
Mae bacteria yn grŵp mawr o ficro-organebau ungell hollbresennol.Fel arfer dim ond ychydig o ficronau ydyn nhw mewn diamedr a gallant ddod mewn amrywiaeth o siapiau, o sfferau i wialenau a throellau.Oherwydd eu hollbresenoldeb, maint, a chyfradd twf cyflym, bacteria, ynghyd â burumau a mowldiau, yw'r halogion biolegol mwyaf cyffredin mewn diwylliant celloedd.
1.1.1 Canfod Halogiad Bacteraidd
Mae halogiad bacteriol yn hawdd ei ganfod trwy archwiliad gweledol o'r diwylliant o fewn ychydig ddyddiau ar ôl iddo gael ei heintio;
Mae diwylliannau heintiedig fel arfer yn ymddangos yn gymylog (hy, cymylog), weithiau gyda ffilm denau ar yr wyneb.
Mae diferion sydyn yn pH y cyfrwng meithrin yn digwydd yn aml hefyd.
O dan ficrosgop pŵer isel, mae'r bacteria'n ymddangos fel gronynnau bach, symudol rhwng y celloedd, a gall arsylwi o dan ficrosgop pŵer uchel ddatrys siapiau bacteria unigol.
1.2Yr Wyddgrug a halogiad gan feirws
1.2.1 Halogiad yr Wyddgrug
Mae mowldiau yn ficro-organebau ewcaryotig o'r deyrnas ffwngaidd sy'n tyfu ar ffurf ffilamentau amlgellog o'r enw hyffae.Mae rhwydweithiau cysylltiol y ffilamentau amlgellog hyn yn cynnwys niwclysau sy'n union yr un fath yn enetig o'r enw cytrefi neu myseliwm.
Yn debyg i halogiad burum, mae pH y diwylliant yn parhau'n sefydlog yn ystod cyfnod cychwynnol yr halogiad ac yna'n cynyddu'n gyflym wrth i'r diwylliant gael ei heintio'n fwy difrifol a mynd yn gymylog.O dan y microsgop, mae myseliwm fel arfer yn ffilamentaidd, weithiau fel clystyrau trwchus o sborau.Gall sborau llawer o fowldiau oroesi mewn amgylcheddau hynod o galed a digroeso yn ystod eu cyfnod segur a dim ond pan fydd yr amodau twf cywir yn dod i'r amlwg y cânt eu hactifadu.
1.2.2 Halogiad Feirws
Mae firysau yn gyfryngau heintus microsgopig sy'n cymryd drosodd peiriannau'r gell letyol ar gyfer atgenhedlu.Mae eu maint eithriadol o fach yn eu gwneud yn anodd eu canfod mewn diwylliant a'u tynnu o adweithyddion a ddefnyddir mewn labordai meithrin celloedd.Gan fod gan y rhan fwyaf o firysau ofynion llym iawn ar gyfer eu gwesteiwr, fel arfer nid ydynt yn effeithio'n andwyol ar ddiwylliannau celloedd rhywogaethau heblaw'r gwesteiwr.
Fodd bynnag, gall defnyddio diwylliannau celloedd sydd wedi'u heintio â firws fod yn berygl difrifol i iechyd personél labordy, yn enwedig os yw celloedd dynol neu primatiaid yn cael eu tyfu yn y labordy.
Gellir canfod haint firaol mewn diwylliannau celloedd trwy ficrosgopeg electron, gwrthimiwnedd gyda set o wrthgyrff, ELISA, neu PCR gyda phremio firaol priodol.
1.3Mycoplasma halogiad
Bacteria syml heb gellfuriau yw mycoplasmas, a chredir mai nhw yw'r organebau hunan-atgynhyrchu lleiaf.Oherwydd eu maint eithriadol o fach (llai nag 1 micron fel arfer), mae'n anodd canfod mycoplasma nes iddynt gyrraedd dwyseddau uchel iawn ac achosi i ddiwylliannau celloedd ddirywio;Tan hynny, fel arfer nid oes unrhyw arwydd amlwg o haint.
1.3.1 Canfod halogiad mycoplasma
Gall rhai mycoplasmas sy'n tyfu'n araf barhau mewn diwylliannau heb achosi marwolaeth celloedd, ond maent yn newid ymddygiad a metaboledd celloedd cynnal mewn diwylliannau.
Gall heintiad mycoplasma cronig gael ei nodweddu gan gyfradd amlhau celloedd is, dwysedd dirlawnder is a chyflymder mewn diwylliant ataliad.
Fodd bynnag, yr unig ffordd ddibynadwy o ganfod halogiad mycoplasma yw profi'r diwylliant yn rheolaidd gan ddefnyddio staenio fflwroleuol (ee, Hoechst 33258), ELISA, PCR, immunostaining, autoradiography, neu brofion microbaidd.
1.4 Halogi burum
Mae burumau yn ewcaryotau ungell o'r deyrnas ffwngaidd, yn amrywio o ran maint o ychydig ficronau (fel arfer) i 40 micron (yn anaml).
1.4.1 Canfod halogiad burum
Yn yr un modd â halogiad bacteriol, gall diwylliannau sydd wedi'u halogi â burum ddod yn gymylog, yn enwedig os yw'r halogiad mewn cyfnod datblygedig.Ychydig iawn y mae pH diwylliannau sydd wedi'u halogi â burum yn newid nes bod yr halogiad yn dod yn fwy difrifol, ac ar yr adeg honno mae'r pH fel arfer yn cynyddu.O dan y microsgop, mae burum yn ymddangos fel gronynnau ofoid neu sfferig unigol a gall gynhyrchu gronynnau llai.
2.Cross haint
Er nad yw mor gyffredin â halogiad microbaidd, mae croeshalogi helaeth o lawer o linellau celloedd â HeLa a llinellau celloedd eraill sy'n tyfu'n gyflym yn broblem wedi'i diffinio'n glir gyda chanlyniadau difrifol.Sicrhewch linellau celloedd o fanciau celloedd ag enw da, gwiriwch nodweddion y llinellau celloedd yn rheolaidd, a defnyddiwch dechnegau aseptig da.Bydd yr arferion hyn yn eich helpu i osgoi croeshalogi.Gall olion bysedd DNA, caryoteipio ac isoteipio gadarnhau a oes croeshalogi yn niwylliant eich celloedd.
Er nad yw mor gyffredin â halogiad microbaidd, mae croeshalogi helaeth o lawer o linellau celloedd â HeLa a llinellau celloedd eraill sy'n tyfu'n gyflym yn broblem wedi'i diffinio'n glir gyda chanlyniadau difrifol.Sicrhewch linellau celloedd o fanciau celloedd ag enw da, gwiriwch nodweddion y llinellau celloedd yn rheolaidd, a defnyddiwch dechnegau aseptig da.Bydd yr arferion hyn yn eich helpu i osgoi croeshalogi.Gall olion bysedd DNA, caryoteipio ac isoteipio gadarnhau a oes croeshalogi yn niwylliant eich celloedd.
Amser postio: Chwefror-01-2023